در زیست شناسی مولکولی، چندریختی طول قطعهٔ بریده شده ( به انگلیسی: RFLP ) روشی است که از اندازه گیری تنوع در توالی دی ان ای همولوگ، معروف به پلی مورفیسم، استفاده می کند تا تنوع افراد، جمعیت ها یا گونه ها را تشخیص دهد یا مکان های ژن را در یک توالی مشخص کند. این اصطلاح باید به خود پلی مورفیسم گفته شود، چنانچه از طریق تفاوت مکان های شناسایی شدهٔ ( detected ) قطعات ( site ) بریده شده با آنزیم محدودکننده، یا روش های آزمایشگاهی مرتبط چنین تفاوت هایی را می توان نشان داد. در آنالیز RFLP، یک نمونه دی ان ای به یک یا چند قطعه توسط آنزیم های محدودکننده بریده می شود، و قطعهٔ بریده شده توسط ژل الکتروفورز با توجه به اندازهٔ آن ها جدا می شود.
اگرچه اکنون RFLP به دلیل وجود فناوری های توالی یابی DNA ارزان قیمت، منسوخ شده است، تجزیه و تحلیل RFLP نخستین تکنیک profiling DNA است که به اندازه کافی برای دیدن کاربردهای گسترده تر ارزان قیمت بود. تجزیه و تحلیل RFLP یک ابزار مهم در نگاشت ژنوم ( Genome mapping ) ، مکان یابی ژن ها برای اختلالات ژنتیکی، تعیین خطر ابتلا ( با تست ژنتیک ) به بیماری و آزمایش اطمینان پدر بودن، بود.
تکنیک اصلی برای تشخیص RFLPها شامل تکه تکه کردن یک نمونه از دی ان ای با استفاده از آنزیم های محدودکننده است، که می تواند به صورت انتخابی یک مولکول دی ان ای را از هرکجا که یک توالی اسید نوکلئیک کوتاه و خاص وجود دارد طی یک فرایند که به عنوان هضم شناخته می شود، شکاف دهد. قطعه های دی ان ای تولیدشده توسط هضم را از طریق فرایندی که با عنوان الکتروفورز ژل آگارز شناخته می شود از هم جدا کرده و از طریق روش ساترن بلات به غشایی منتقل می شوند. غشاء با هیبریداسیون با یک پروب DNA برچسب زده می شود، و سپس طول قطعه هایی که مکمل پروب هستند را تعیین می کنند. گفته می شود RFLP زمانی رخ می دهد که طول یک قطعهٔ شناسایی شده بین افراد متفاوت باشد و این نشانگر چندریختی ( پلی مورفیسم ) توالی همسان است. هر قطعه با طول متفاوت یک آلل در نظر گرفته می شود، چه واقعاً حاوی یک منطقه کد کننده باشد یا نباشد، که می تواند در آنالیز ژنتیکی بعدی استفاده شود.
تجزیه و تحلیل تغییرات RFLP در ژنوم قبلاً ابزاری حیاتی در نقشه برداری ژنوم و آنالیز بیماری های ژنتیکی بود. اگر پژوهشگران در تلاش بودند تا ابتدا موقعیت کروموزومی ژن بیماری خاص را تعیین کنند، آن ها بابد دی ان ایِ اعضای یک خانوادهٔ مبتلا به این بیماری را تجزیه و تحلیل می کردند و به دنبال آلل های RFLP می گشتند تا الگوی مشابهی از وراثت را مانند بیماری نشان می دهند ( مراجعه کنید. ارتباط ژنتیکی ) . هنگامی که ژن یک بیماری مکان یابی شد، از آن به بعد با تجزیه و تحلیل RFLP در خانواده های دیگر می تواند نشان داد چه کسی در معرض خطر این بیماری است، یا چه کسی احتمالاً ناقل ژن های جهش یافته است. آزمایش RFLP در شناسایی و تمایز جانداران از طریق تجزیه و تحلیل الگوهای منحصر به فرد در ژنوم استفاده می شود. همچنین در شناسایی میزان نوترکیبی در محل های بین قطعه های محدودشونده استفاده می شود.
این نوشته برگرفته از سایت ویکی پدیا می باشد، اگر نادرست یا توهین آمیز است، لطفا گزارش دهید: گزارش تخلفاگرچه اکنون RFLP به دلیل وجود فناوری های توالی یابی DNA ارزان قیمت، منسوخ شده است، تجزیه و تحلیل RFLP نخستین تکنیک profiling DNA است که به اندازه کافی برای دیدن کاربردهای گسترده تر ارزان قیمت بود. تجزیه و تحلیل RFLP یک ابزار مهم در نگاشت ژنوم ( Genome mapping ) ، مکان یابی ژن ها برای اختلالات ژنتیکی، تعیین خطر ابتلا ( با تست ژنتیک ) به بیماری و آزمایش اطمینان پدر بودن، بود.
تکنیک اصلی برای تشخیص RFLPها شامل تکه تکه کردن یک نمونه از دی ان ای با استفاده از آنزیم های محدودکننده است، که می تواند به صورت انتخابی یک مولکول دی ان ای را از هرکجا که یک توالی اسید نوکلئیک کوتاه و خاص وجود دارد طی یک فرایند که به عنوان هضم شناخته می شود، شکاف دهد. قطعه های دی ان ای تولیدشده توسط هضم را از طریق فرایندی که با عنوان الکتروفورز ژل آگارز شناخته می شود از هم جدا کرده و از طریق روش ساترن بلات به غشایی منتقل می شوند. غشاء با هیبریداسیون با یک پروب DNA برچسب زده می شود، و سپس طول قطعه هایی که مکمل پروب هستند را تعیین می کنند. گفته می شود RFLP زمانی رخ می دهد که طول یک قطعهٔ شناسایی شده بین افراد متفاوت باشد و این نشانگر چندریختی ( پلی مورفیسم ) توالی همسان است. هر قطعه با طول متفاوت یک آلل در نظر گرفته می شود، چه واقعاً حاوی یک منطقه کد کننده باشد یا نباشد، که می تواند در آنالیز ژنتیکی بعدی استفاده شود.
تجزیه و تحلیل تغییرات RFLP در ژنوم قبلاً ابزاری حیاتی در نقشه برداری ژنوم و آنالیز بیماری های ژنتیکی بود. اگر پژوهشگران در تلاش بودند تا ابتدا موقعیت کروموزومی ژن بیماری خاص را تعیین کنند، آن ها بابد دی ان ایِ اعضای یک خانوادهٔ مبتلا به این بیماری را تجزیه و تحلیل می کردند و به دنبال آلل های RFLP می گشتند تا الگوی مشابهی از وراثت را مانند بیماری نشان می دهند ( مراجعه کنید. ارتباط ژنتیکی ) . هنگامی که ژن یک بیماری مکان یابی شد، از آن به بعد با تجزیه و تحلیل RFLP در خانواده های دیگر می تواند نشان داد چه کسی در معرض خطر این بیماری است، یا چه کسی احتمالاً ناقل ژن های جهش یافته است. آزمایش RFLP در شناسایی و تمایز جانداران از طریق تجزیه و تحلیل الگوهای منحصر به فرد در ژنوم استفاده می شود. همچنین در شناسایی میزان نوترکیبی در محل های بین قطعه های محدودشونده استفاده می شود.
