پی بی ار۳۲۲

پی بی آر۳۲۲. وکتور کلونینگ پلاسمیدی pBR322 اکثر باکتریها حاوی یکسری اطلاعات خارج کروموزومی DNA به نام پلاسمید می باشند. پلاسمید یک مولکول حلقوی بسته نسبتاً کوچک می باشد که دارای ژنهای مقاومت به آنتی بیوتیک یا ژنهای متابولیسم سوبستراهای غیرمعمولی را حمل می نماید. یکی از جالب توجه ترین پلاسمیدها وکتور pBR322 می باشد ( پس از ساخته شدن بوسیله BolivarوRodriguez ) به این نام شناخته شده است. این پلاسمید دارای مبدأ همانندسازی یا ori باکتریایی می باشد که همانندسازی این باکتری را در میزبان باکتریایی تضمین می کند. این پلاسمید همچنین دارای دو ژن رمز کننده مقاومت به آنتی بیوتیک های آمپی سیلین و تتراسایکلین می باشد که این ژنها امکان انتخاب سلولهای حاوی این پلاسمید را می دهند. باکتریهایی که این پلاسمید را دریافت کرده باشند در محیط حاوی آنتی بیوتیک ذکر شده قابلیت رشد و تقسیم دارند. جایگاه های شناسایی متعددی مربوط به آنزیم های محدود کننده در این پلاسمید وجود دارد که این جایگاه ها برای وارد کردن DNA خارجی به این پلاسمید مورد استفاده قرار می گیرد. تنوع در جایگاه های شناسایی نه تنها امکان انتخاب یک آنزیم محدود کننده را آسانتر می کند بلکه با توجه به اینکه بعضی از این جایگاه ها در یک ژن مقاومت به آنتی بیوتیک ها قرار دارند حضور یک قطعه خارجی منجر به از بین رفتن مقاومت به آنتی بیوتیک می شود، این روش اصطلاحاً ورود غیرفعال کننده Insertion inactivation نامیده می شود.