ایزوپروپیل بتا - دی - ۱ - تیوگالاکتوپیرانوزید ( به انگلیسی: Isopropyl β - D - 1 - thiogalactopyranoside ) یک ترکیب در زیست شناسی مولکولی است. این ترکیب مقلد مولکولی آلولاکتوز، یک متابولیت لاکتوز است که باعث رونویسی اپرون لاک می شود و بنابراین از آن برای القای پروتئین در جایی که ژن تحت کنترل عملگر لاک است، استفاده می شود. به صورت خلاصه آی پی تی جی برای بیان ژنهای تراریخته متصل به اپرون لاک در بیوشیمی استفاده می شود.
مانند آلولاکتوز، IPTG به سرکوبگر لاک متصل می شود و سرکوبگر تترامریک را به روش آلوستریک از اپراتور لاک آزاد می کند و بدین ترتیب امکان رونویسی ژن ها در اپرون لاک مانند ژن کد کننده بتا - گالاکتوزیداز، آنزیم هیدرولاز فراهم می شود که کاتالیزور است. هیدرولیز β - گالاکتوزیدها به مونوساکاریدها - سایپرز، باشگاه دانش اما بر خلاف آلولاکتوز، اتم گوگرد ( S ) پیوند شیمیایی ایجاد می کند که توسط سلول غیر هیدرولیز است و از متابولیسم یا تخریب القا کننده سلول جلوگیری می کند؛ بنابراین، غلظت آن در طی یک آزمایش ثابت می ماند.
جذب IPTG توسط E. coli می تواند مستقل از عملکرد لاکتوزپرماز باشد، زیرا سایر مسیرهای حمل و نقل نیز درگیر هستند. [ ۱] در غلظت کم، IPTG از طریق لاکتوز پرماز وارد سلول ها می شود، اما در غلظت های بالا ( که معمولاً برای القای پروتئین استفاده می شود ) ، IPTG می تواند به طور مستقل از لاکتوز پرماز وارد سلول شود. [ ۲]
هنگامی که به صورت پودر در دمای ۴ درجه سانتیگراد یا پایین نگهداری می شود، IPTG به مدت ۵ سال پایدار است. در محلول به طور قابل توجهی پایدارتر است. سیگما توصیه می کند که بیش از یک ماه در دمای اتاق نگهداری نشود. [ ۳] IPTG یک القا effective کننده مؤثر در بیان پروتئین در محدوده غلظت 100 میکرومولار تا 3. 0 میلی متر است. به طور معمول، یک محلول استریل و فیلتر شده ۱ میلی متری IPTG 1: 1000 به محیط کشت یا مخزن رشد باکتری در حال رشد نمایی ( لگاریتمیک ) افزوده می شود تا غلظت نهایی ۱ میلی مول باشد. غلظت استفاده شده به قدرت القای مورد نیاز و همچنین ژنوتیپ سلولها یا پلاسمید مورد استفاده بستگی دارد. اگر lacI q، جهشی داشته باشد که بیش از حد سرکوبگر لاک را تولید می کند، ممکن است غلظت بالاتر IPTG لازم باشد.
در صفحه سفید و آبی، از IPTG همراه با X - gal استفاده می شود. صفحه سفید - آبی به شما اجازه می دهد در آزمایش های شبیه سازی، کلنی هایی که با پلاسمید نوترکیب به جای یک غیر نوترکیب تغییر شکل داده اند، شناسایی شود. [ نیازمند منبع]
این نوشته برگرفته از سایت ویکی پدیا می باشد، اگر نادرست یا توهین آمیز است، لطفا گزارش دهید: گزارش تخلفمانند آلولاکتوز، IPTG به سرکوبگر لاک متصل می شود و سرکوبگر تترامریک را به روش آلوستریک از اپراتور لاک آزاد می کند و بدین ترتیب امکان رونویسی ژن ها در اپرون لاک مانند ژن کد کننده بتا - گالاکتوزیداز، آنزیم هیدرولاز فراهم می شود که کاتالیزور است. هیدرولیز β - گالاکتوزیدها به مونوساکاریدها - سایپرز، باشگاه دانش اما بر خلاف آلولاکتوز، اتم گوگرد ( S ) پیوند شیمیایی ایجاد می کند که توسط سلول غیر هیدرولیز است و از متابولیسم یا تخریب القا کننده سلول جلوگیری می کند؛ بنابراین، غلظت آن در طی یک آزمایش ثابت می ماند.
جذب IPTG توسط E. coli می تواند مستقل از عملکرد لاکتوزپرماز باشد، زیرا سایر مسیرهای حمل و نقل نیز درگیر هستند. [ ۱] در غلظت کم، IPTG از طریق لاکتوز پرماز وارد سلول ها می شود، اما در غلظت های بالا ( که معمولاً برای القای پروتئین استفاده می شود ) ، IPTG می تواند به طور مستقل از لاکتوز پرماز وارد سلول شود. [ ۲]
هنگامی که به صورت پودر در دمای ۴ درجه سانتیگراد یا پایین نگهداری می شود، IPTG به مدت ۵ سال پایدار است. در محلول به طور قابل توجهی پایدارتر است. سیگما توصیه می کند که بیش از یک ماه در دمای اتاق نگهداری نشود. [ ۳] IPTG یک القا effective کننده مؤثر در بیان پروتئین در محدوده غلظت 100 میکرومولار تا 3. 0 میلی متر است. به طور معمول، یک محلول استریل و فیلتر شده ۱ میلی متری IPTG 1: 1000 به محیط کشت یا مخزن رشد باکتری در حال رشد نمایی ( لگاریتمیک ) افزوده می شود تا غلظت نهایی ۱ میلی مول باشد. غلظت استفاده شده به قدرت القای مورد نیاز و همچنین ژنوتیپ سلولها یا پلاسمید مورد استفاده بستگی دارد. اگر lacI q، جهشی داشته باشد که بیش از حد سرکوبگر لاک را تولید می کند، ممکن است غلظت بالاتر IPTG لازم باشد.
در صفحه سفید و آبی، از IPTG همراه با X - gal استفاده می شود. صفحه سفید - آبی به شما اجازه می دهد در آزمایش های شبیه سازی، کلنی هایی که با پلاسمید نوترکیب به جای یک غیر نوترکیب تغییر شکل داده اند، شناسایی شود. [ نیازمند منبع]
